避雷干货 | 科研萌新怎么搞定预实验?

作者:山屿森潯

编辑:小怡

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“预实验”体现在“预”字,即预先在正式科研项目开始之前所做的初步研究。预先对课题实验方法进行测试,探索项目的可行性,是科研设计不可或缺的组成部分。
一个良好的预实验需要注意什么呢?笔者在此结合自身科研经历,略表拙见。

 严  谨 
体现在预实验前的文献阅读储备、实验方案设计的严谨性。
在预实验开始前,应充分阅读课题相关的研究文献,了解研究领域的最新进展,避免自己的课题没有创新,更可怕的是别人已经做过而不自知。

在笔者的一个课题中,需对C57小鼠进行肥胖造模。因经费有限,对比了所在城市的实验动物生存机构,选择了价格较低的一家。拿到小鼠后,发现有断尾、精神不振等情况,但没在意就开展了造模实验。

眼瞅造模时间已足够长,可是高脂饮食组和对照组的体重却没有明显差别。咨询同事后得知购买机构的资质水平确实在业内评价不高。后来经同事介绍加实地考察,更换小鼠后造模成功了,但影响了实验进度。

所以经费虽少,但不能贪便宜,否则不仅不能省钱,还会影响实验进度。

 细  心 

在成为科研工作者初期,笔者有着盲目的自信。

对于EP管那是从来不编号的,自认为离心机转子上的数字、双面板上96孔的位置等已经替我做好了标记。正为自己的“聪明才智”洋洋得意之时,放EP管的板子被碰翻在地,EP管也随之散落一地。从那时起,笔者便老老实实地做好实验标记,不让小聪明误事。
此外,PCR过程中,忘记加引物、酶等事件也会在大量繁重的实验室工作中发生,造成实验用品和时间的浪费。实验开始之前,所有待用物品清点一遍。不要进了安全柜,才发现移液管没有灭菌;不要该配缓冲液时,才发现某个药品已经不够;不要该水浴了,才发现水浴锅还没有开;不要该对小鼠麻醉了,才发现麻醉剂还没有配……
另外,若有疲劳感,应做好实验记录,收拾好实验用品,待精力充沛、思路清晰时再进行实验,疲劳实验犹如疲劳驾驶

   准   

实验试剂耗材方面,切忌在正式实验开展之前就按照正式实验所需的数量去准备试剂耗材。

预实验很重要的一项内容就是要摸索选择试剂的可靠性。我们只需准确购买预实验所需要的剂量或份数即可,若发现所选试剂耗材达不到实验要求,立即更换可能适合的试剂耗材即可,不会造成大量浪费。

再比如实验需要设计PCR引物或探针,若先前已有大量设计经验且成功率较高,那么请继续。若不是,请老老实实按照高IF文章中提供的引物或探针序列进行合成。另外,专利中提供的引物或探针看看就好。

   狠   

实验遇到失败是必然。我们应从失败中狠查原因,不找到原因不应进行进一步实验操作。例如小鼠造模失败,饲料配方、喂养方式、小鼠品系等原因需查明;qPCR过程中空白对照起峰,污染、操作习惯、气溶胶等原因需查明;细胞培养是否有污染等。

实验操作中,也要狠起来。

例如,一只硕大的老鼠放在你面前,要腹腔注射麻醉剂。你有勇气和力气用一只手抓住它固定好它吗?做的多了你就会发现,一定要狠,深呼一口气,左手抓好颈和背部皮肤,右手注射,一气呵成。
总之,预实验就是迷你版的正式实验,希望萌新们在进行预实验的时候一定要尽可能地准备周全,这样才能更快地推进正式实验。

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